西洋参果肉药材及西洋参果总皂苷片的临床药学研究,一种西洋参软枝加工方法，

中药现代化的定义是在继承和发扬中药传统特色和优势的基础上，运用现代科学技术研究理论、方法和手段，借鉴国际公认的医学标准和规范，开展更深入的中药研发、生产和监督，提高中药的国际竞争力和影响力，使其适应现代社会的发展需要，丰富其内涵。中药新药研发是主要研究方向之一。西洋参果总皂苷片是研究组开发的具有自主知识产权的中药。它不仅具有治疗冠心病的生物学功效，而且具有广阔的应用前景和良好的临床疗效。本文以西洋参果肉和西洋参果总皂苷片(4种中药)为核心，开展了以下研究工作。

1.综述了西洋参果的生物学功效、化学成分及治疗冠心病的中药研究进展。

2.西洋参果肉的临床前研究是首次进行的。研究内容包括药材产地加工工艺、药材质量研究、药材质量标准制定和稳定性考察研究。

首次对西洋参果片中总皂苷的处方和工艺进行了研究，并对西洋参果片中总皂苷的质量进行了研究。同时，建立了西洋参果片中总皂苷的质量标准，并对其稳定性进行了考察。

通过对西洋参果肉药材和西洋参果总皂苷片(4种中药)的临床前药学研究，建立了西洋参果肉和西洋参果总皂苷片的质量标准，为充分研究和利用天然资源西洋参果肉，将其开发为治疗冠心病的西洋参果总皂苷片(创新药物)提供了科学依据。

中药现代化是在充分利用现代科学技术理论、方法和手段的基础上，继承和发展中药的优势和特点，借鉴国际通用的医学标准和规范，研究、开发、生产和管理中药，提高中药的国际竞争力，适应当代社会发展的需要，内涵丰富，开发和研究中药新的药用部位是主要研究方向之一。

我们团队开发了具有自主知识产权的西洋参果总皂苷片，西洋参果总皂苷片具有治疗冠心病的作用，具有良好的应用前景。本文围绕西洋参果肉和西洋参果总皂苷片这两种新药材进行了以下研究工作。

1 .综述了西洋参的化学成分、生物学功能及中医药治疗冠心病的研究进展。

2.首次对西洋参果肉原料进行了临床前研究，研究内容包括加工工艺、质量研究、稳定性考察和质量标准的制定。

3.首次对美国人参总皂苷片进行了研究，研究内容包括处方工艺、质量研究，同时进行了稳定性考察和质量标准的制定。

摘要:通过对西洋参果肉和西洋参果总皂苷片原料药的临床前药学研究，建立了西洋参果肉和西洋参果总皂苷片的质量标准，为充分研究和利用西洋参果肉和西洋参果总皂苷片，并将其开发为治疗冠心病的创新药物提供了科学依据。

西洋参果肉是西洋参的成熟果实。它资源丰富，营养丰富，成分有效，是一种值得研究开发的自然资源。

西洋参(西洋参)又称西洋参、西洋参、西洋参和广东参，是五加科人参属植物，味甜、微苦、性冷淡，入心、肺、肾经。主要功能是滋补、滋阴降火、益气生津。主要产地是美国、法国、加拿大等。西洋参是[进口中药材的主要品种1]。西洋参于1978年引入中国，并于1980年成功种植。除了西洋参的主根，其他部位的药用价值也逐渐发掘出来，西洋参叶、西洋参花和西洋参果实的药用价值越来越受到重视。西洋参的果实是人参的成熟果实。五加科人参属西洋参。西洋参分为单茎、双茎和多茎。3-4年生的每根茎可以连接10-30个果实。果实为肉质核果，呈扁平肾形或椭圆形，顶部常凹陷，基部有时凹陷较少，初期为绿色。成熟时为鲜红色至暗红色，有光泽，长8.5 ~ 12毫米，宽4.5 ~ 8.5 ~ 12毫米，厚2 ~ 4毫米，肉质果皮皱缩，脉条自基部至顶部，多2枚果核，肾形，稍平，表面粗糙，黄白色，背部拱起，两侧稍倾斜。基部有少量隆起，坚硬，壳厚约0.2 ~ 0.5毫米；果壳含有一粒种子，呈扁平肾形，一侧被截断或略凹，黄褐色或浅褐色，腹侧有浅颜色的种脊，基部面向果皮的吸水部分为种子脐，种子脐靠近种子脐，种皮薄，胚乳丰富，油脂丰富，空气稀薄，果皮微苦、酸甜，种子微苦、有腥味。开花从6月到7月，果实成熟从8月到9月，[2-3]。

西洋参果呈囊状，略带充气，味道微甜，余味微苦辛辣。其表面为紫红色或紫黑色，直径3-6毫米，呈现不规则片状或皱缩状肿块。在一些水果中，环状花盘是持久的，花柱在花盘中，柱头可以分成叉形。

西洋参果肉的粉末是棕色的。西洋参果实表皮细胞呈红色，表面呈多边形，直径30 ~ 60μ m，横截面呈矩形，气孔不确定。果肉薄壁细胞多为圆形或矩形，导管呈环状、螺旋状或网状，但多为环状，直径10 ~ 20 μm；导管和柱头均有薄壁，表皮细胞外壁突出，多为剑形或稍具乳头状和绒毛。1.2西洋参果实化学成分的研究进展1854年，美国植物化学家加里奎斯开始研究西洋参的化学成分。无定形物质是从加拿大生产的西洋参中分离出来的，命名为人参[5]。近年来，对西洋参的研究逐渐广泛深入。西洋参果实的化学成分与西洋参相似。西洋参果实的化学成分包括各种人参皂甙、氨基酸、多糖、脂肪酸、甾醇、聚乙炔、黄酮类、挥发油、无机元素等。人参皂甙是含量最高的化学成分。据报道，西洋参地下和地上部分的总皂苷含量分别为主根的4.25%、侧根的4.80%、茎叶的11.99%和果实的8.00%，表明西洋参地上部分，尤其是西洋参果实，是一种值得开发利用的宝贵资源。

西洋参果实是从国外进口的珍贵西洋参的果实。据研究报告，西洋参果实中含有多种人参皂苷，其中总人参皂苷的含量明显高于西洋参的根。西洋参果肉还含有蛋白质、挥发油、氨基酸、多糖、无机盐和果胶等化学成分。[4]开发西洋参新开发的药用部分西洋参果，不仅是为了提高西洋参果的经济效益，也是为了充分利用西洋参资源。根据研究报告，西洋参的各个部位都含有人参皂苷，从西洋参中鉴定出50种人参皂苷。1998年，李高祥[分离鉴定西洋参果皂苷。通过高效薄层(HTLC)检测和快速原子轰击质谱(FAB-Ms)鉴定出8种人参皂苷，其中人参皂苷re、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rg2属于人参皂苷三醇。丙二酸单酰基人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rg3和人参皂苷Rh2属于人参皂苷二醇型皂苷；人参皂苷R0属于齐墩果酸型皂苷，上述8种皂苷首次从西洋参果实中分离鉴定。

1999年，李平亚等人[7]从产于加拿大不列颠哥伦比亚省的西洋参果实中提取分离出6种糖缀合物，并通过理化常数和光谱分析进行鉴定。其中5种为人参皂苷化合物，即20(R)-人参皂苷Rg3、20(S)-人参皂苷Rg3、人参皂苷Rd、人参皂苷re和人参皂苷Rb3，均为首次从西洋参果实中分离得到的已知化合物。1999年，李平亚等人[5]系统地研究了西洋参果实的化学成分。在加拿大生产的西洋参果实中，分离出26种化合物，包括20种人参皂苷化合物和6种其他类型的化合物。通过理化常数、化学方法和光谱分析鉴定了26种化合物的化学结构。已知的人参皂苷化合物有人参皂苷Ra1、人参皂苷Ra2、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd、人参皂苷re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rg2、人参皂苷20(S)-Rg3、人参皂苷20(R)-Rg3、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rh2、人参皂苷F11和RT5，包括文献中未报道的4个新化合物(3个三萜人参皂苷和1个三糖化合物)，分别命名为西洋参皂苷F1、西洋参皂苷F2、西洋参皂苷F3和西洋参皂苷F42000年，王力军等人从加拿大西部水果中提取分离。通过硅胶柱色谱、高效液相色谱等方法得到四种化合物。对化学常数和popper数据进行了分析和鉴定。其中三种是人参皂苷化合物，即人参皂苷Ra1、20(R)-人参皂苷Rg3和人参皂苷RT5，它们是首次从西洋参果实中分离得到的。在2000年郝秀华等人对加拿大产西洋参皂苷成分的研究中，分离出5种人参皂苷。化学常数和光谱数据鉴定了4种已知化合物，即达玛烷三萜皂苷(人参皂苷Rh1、人参皂苷Rh2、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rg2)，而达玛烷新三萜皂苷3β、12β、20(S)、24ξ、25-五羟基达玛-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷是首次从西洋参果实中分离得到的。

2001年，刘桂颜等人[10]研究了人参皂苷Rg3和Rh2的检测方法。采用反相高效液相色谱法，在以下色谱条件下检测人参皂苷Rg3和Rh2:垫片-PackCLC-ODS柱，乙腈-水(48: 52)为流动相，流速1.0毫升/分钟，检测波长203纳米。Rg3和Rh2不仅能在基线时与其他皂苷分离，而且Rh2的保留时间也不能延迟，柱效更好，峰型更好，灵敏度高，平均回收率≥95.3%，相对标准偏差≤29%。该方法简单、准确。2001年，刘桂颜等人[11]应用反相高效液相色谱(反相高效液相色谱法)分析检测西洋参果肉发酵液中人参皂苷的含量。检测结果表明:人参皂苷Rb1含量最高，为47.34，其次人参皂苷Rb2含量最高，为44.90。此外，还检测了人参皂苷Rc、人参皂苷Rd、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rg2的比含量。研究结果表明，西洋参果浆特殊发酵工艺得到的发酵液中人参皂苷化学成分含量无明显损失，但部分单体皂苷的相对含量有明显变化。因此，发酵液的药理药效与其原料不同，具有更大的开发价值。2007年，京悦等[12]利用大孔吸附树脂、硅胶柱色谱、薄层色谱等方法进行分离、重结晶纯化、理化常数和光谱数据分析，鉴定西洋参果实的化学成分。分析结果表明，我分离出14种化合物，包括12种人参皂苷化合物，即:20(R)-原人参二醇、24(R)-假人参皂苷、20(S)-人参二醇、20(R)-原人参三醇、20(R)-人参皂苷Rg3、20(S)？人参皂苷Rh2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷-Rd、人参皂苷Rg1和人参皂苷F11，其中化合物20(R)-原人参二醇、24(R)-假人参皂苷和20(S)-人参二醇首次在西洋参果实中发现。

2007年，许丹等人[13]对加拿大生产的西洋参果实进行了研究。D101大孔吸附树脂柱、硅胶柱、RP-8和RP-18柱进行分离提取，根据理化性质和光谱数据鉴定出人参皂苷F1、人参皂苷Ra1和人参皂苷II三种化合物。2008年，马萧宁·[14]首次采用酸水解法水解西洋参果总皂苷，得到11种化合物。其中7个通过物理化学常数和光谱分析鉴定。它们是人参皂苷衍生物:20(R)-达玛烷-3β，12β，20，25-四醇，20(R)-达玛烷-3β，6α，12β，20，首次从西洋参果皂苷的酸水解产物中获得。25-戊醇、20(S)-人参二醇、20(S)-人参三醇、20(R)原人参二醇、20(R)-原人参三醇、24(R)-伪人参皂苷2008年，王磊[15]首次采用中压柱色谱技术对西洋参果皂苷成分进行制备分离，得到7个化合物，7个化合物被鉴定为人参皂苷Rg1、人参皂苷re、人参皂苷Rd、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、20(S)-人参皂苷2010年，刘金平等[2]采用高效液相制备、重复硅胶柱色谱、重结晶、C18反相柱色谱等先进技术分离西洋参果皂苷成分。获得了五种化合物。根据理化性质和光谱数据分析鉴定，它们是:3-O- β-D-吡喃葡萄糖基-(1-2)-β-D-吡喃木糖基-dama -25(26)- en -3β，12β，20S，24ξ-四醇(ⅰ)，假人参皂苷F11(ⅱ)，西洋参皂苷L10(ⅲ)，人参皂苷Rc(ⅳ)和人参皂苷Rb1(ⅴ)，其中化合物ⅰ是SciFinder搜索到的新化合物，未见报道

1998年，齐鲁等人[[16]通过提取和色谱法从西洋参果实中提取和分离脂肪酸成分。首次从西洋参果实中分离脂肪酸单体化合物，得到两种晶体，分别鉴定为十八酸和14-甲基十五酸甲酯。1998年，李高祥·[从西洋参果实中分离鉴定出3种脂肪酸酯成分——色氨酸和油酸苷。1999年，丁志恩等人[分析了西洋参果实的成分。结果表明，西洋参果实中含有7种必需游离氨基酸。

。1999年，李平亚等人[7]从产于加拿大不列颠哥伦比亚省的西洋参果实中提取分离出6种糖缀合物，并通过理化常数和光谱分析进行鉴定。其中，非皂苷类化学物质是胡萝卜素，这是首次从西洋参果实中分离出的已知化合物。2000年，王力军等人[8]用硅胶柱色谱、高效液相色谱等方法从加拿大西部水果中提取分离了四种化合物。通过对管理常数和popper数据的分析和鉴定，首次分离出化合物α-D-吡喃木糖基-(1-6)-α-D-吡喃葡萄糖基-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。2002年，孟项英等人[提出了一种通过研究国产西洋参不同部位黄酮含量来测定西洋参中黄酮含量的方法。西洋参果实中首次发现黄酮类化合物。

2007年，京悦等[12]采用大孔吸附树脂、硅胶柱色谱、薄层色谱等方法进行分离，并采用重结晶纯化、理化常数和光谱数据分析方法对西洋参果实的化学成分进行鉴定和分析。分析结果共得到14种化合物，其中β谷甾醇和胡萝卜素为2种非皂苷化合物。

与西洋参相似，西洋参果实具有多种生物活性。国内外的研究趋势和热点主要集中在抗病毒、抗肿瘤、心肌保护、抗氧化、降血压、降血糖和增强记忆方面。

卢爱平等，[19]2006年研究了西洋参果总皂苷对冠状动脉结扎犬血流动力学和心肌缺血的影响。实验结果表明，西洋参果总皂苷能减少急性心肌梗死后的心肌梗死面积，并能显著改善急性心肌缺血时心电图ST段异常。结果表明，西洋参果总皂苷可通过增加冠状动脉血流量、改善心肌供血供氧、提高心脏工作效率来保护缺血心肌。2010年，李燕郊[20]首次用大剂量异丙肾上腺素腹腔注射建立大鼠急性心肌缺血实验模型，并在实验模型中观察了西洋参果总皂苷在三组不同剂量给药后对缺血心电图的影响。实验结果表明，西洋参果总皂苷对异丙肾上腺素引起的大鼠心肌缺血有明显的保护作用，证明西洋参果总皂苷具有较好的抗心肌缺血作用。

2017年，张楠琪等人[21]利用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)技术结合多元统计分析，对西洋参果总皂苷的入血成分进行分析鉴定，鉴定出9种入血成分，可能是西洋参果总皂苷体内直接发挥作用的物质，具有抗心肌缺血、抗肿瘤和神经保护作用。有5种原型成分:人参皂苷F11、人参皂苷Rc、Rb3、Rd和原人参三醇，皂苷化合物的4种代谢产物:人参皂苷CK、Rh2、原人参二醇和原人参三醇RT5。

1999年，李平亚等[7]研究了西洋参总皂苷的抗病毒活性，发现西洋参总皂苷对HSV-1、Adv-ⅲ、脊髓灰质炎ⅴ、CB3和VSV有明显的抑制作用。

1998年，齐鲁等人[首次从西洋参果实中分离并鉴定出脂肪酸单体化合物。这两种化合物分别是十八烷酸和14-甲基十五烷酸甲酯。体内外抗肿瘤活性研究表明，西洋参果脂肪成分ⅰ具有很强的抗肿瘤活性，其作用强度非常接近消化道肿瘤常用化疗药物5-氟尿嘧啶。十八酸是一种高活性的抗肿瘤单体化合物，直接抑制人肝癌和宫颈癌细胞的增殖和生产，具有明显的细胞毒活性。

2007年，王磊等[1]在西洋参化学成分和药理活性的研究进展中报道，西洋参果总皂苷具有抗肿瘤作用。2009年，刘娜等人[22]在稀有抗肿瘤人参皂苷衍生物的制备和分离研究中，首次发现20(R)-达玛烷-3β，12β，20，25-四醇(25-羟基-PPD)是从西洋参果总皂苷中提取分离的原人参二醇皂苷元衍生物。2015年，郭俊辉等人[23]在25-羟基-PPD及其衍生物抗肿瘤活性的研究进展中报道，25-羟基-PPD通过抑制癌细胞增殖，停止肿瘤细胞周期，诱导癌细胞凋亡，对肺癌、前列腺癌、乳腺癌和胰腺癌的肿瘤细胞系有很强的抑制作用，其生长抑制生物活性比人参皂苷Rg3高5-15倍。

2007年，王磊等人[1]在西洋参化学成分和药理活性的研究进展中报道，西洋参果提取物能消除心肌细胞中的氧自由基，西洋参果提取物及其根提取物能产生更多的保护作用。从西洋参果实中分离的多糖具有降血糖和治疗肥胖的作用。西洋参果提取物对顺铂引起的恶心呕吐有潜在的治疗作用。人参皂苷Rb合剂具有最有效的抗惊厥作用，还具有保护神经的作用。此外，西洋参提取物具有预防急性呼吸道疾病和减弱肌酸激酶的作用。

1.4中医药治疗冠心病的研究进展
1.4.1具有冠心病功能的中药
1.4.2治疗冠心病的中药提取物及有效成分
1.4.3治疗冠心病的临床常用制剂
1.4.4中西医结合治疗冠心病的临床分析

2.2质量研究和标准制定
2.2.1人参皂苷提取方法
2.2.2人参皂苷分离方法
2.2.3人参皂苷鉴定
2.2.4鉴定
2.2.5检查
2.2.6含量测定
2.2.7质量标准制定

2.3稳定性研究。
2.3.1目标
2.3.2条件
2.3.3实验方法
2.3.4调查项目
2.3.5实验结果
2.3.6结论

3.3西洋参果总皂苷片的质量研究和标准制定
3.3.1制剂基础
3.3.2来源、规格、检验标准
3.3.3制剂
3.3.4制剂工艺和工艺流程图
3.3.5质量标准制定

3.4稳定性研究
3.4.1目标
3.4.2条件
3.4.3实验方法
3.4.4调查项目
3.4.5实验结果
3.4.6结论

综述了西洋参果实的生物活性和化学成分的研究进展。综述了中医药治疗冠心病的研究进展。

西洋参浆加工工艺稳定，质量可控，质量标准可行，稳定性好。